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前言：

食用菌是人們?nèi)粘Ｉ攀持械某Ｒ娛巢?，不僅味道鮮美，而且營養(yǎng)價(jià)值較高，具有良好的保健功能。食用菌中含有豐富的麥角甾醇，它是一種具有重要營養(yǎng)和生理活性的甾體化合物，對(duì)人體鈣磷代謝和骨骼健康具有重要作用。此外，研究表明麥角甾醇具有潛在的健康益處和重要的生理功能，包括降低膽固醇和減少心血管疾病發(fā)生率、降血糖、抗氧化、抗菌和抗腫瘤活性等，使其成為評(píng)價(jià)食用菌營養(yǎng)價(jià)值和質(zhì)量的重要指標(biāo)之一。食用菌中的麥角甾醇主要以游離形式存在，其含量因菌種、生長環(huán)境、栽培方式和加工工藝等因素而存在顯著差異，因此建立科學(xué)準(zhǔn)確的檢測(cè)方法對(duì)食用菌品質(zhì)評(píng)價(jià)至關(guān)重要。

由中華全國供銷合作總社昆明食用菌研究所牽頭，聯(lián)合了賽默飛等11家專業(yè)機(jī)構(gòu)共同制定的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)GH/T 1475-2024《食用菌中游離麥角甾醇的測(cè)定 高效液相色譜法》，已于2025年6月1日起在全國范圍內(nèi)正式實(shí)施。該標(biāo)準(zhǔn)建立了食用菌中游離麥角甾醇含量的統(tǒng)一檢測(cè)方法，標(biāo)準(zhǔn)詳細(xì)規(guī)定了試劑材料、儀器設(shè)備、樣品前處理、分析條件、結(jié)果計(jì)算和精密度要求等技術(shù)內(nèi)容，為食用菌質(zhì)量評(píng)價(jià)提供了科學(xué)可靠的技術(shù)依據(jù)。在GH/T 1475-2024標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布之前，我國食用菌行業(yè)中游離麥角甾醇的檢測(cè)方法缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，不同實(shí)驗(yàn)室和檢測(cè)機(jī)構(gòu)采用的自建方法存在較大差異，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果難以比較，影響了產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)價(jià)的客觀性和公平性。

賽默飛作為標(biāo)準(zhǔn)起草單位之一，參與了標(biāo)準(zhǔn)編制，在賽默飛實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了檢測(cè)方法驗(yàn)證等工作。實(shí)驗(yàn)中采用賽默飛Vanquish液相色譜，通過大批量樣本的檢測(cè)，得到了良好的精密度、線性關(guān)系、加標(biāo)回收率等結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)選用賽默飛經(jīng)典的Hypersil BDS C18色譜柱，該色譜柱采用堿脫活處理，使得硅膠表面殘余硅醇基活性降至最低，化合物峰形優(yōu)異，能夠有效減少拖尾，并且具有出色的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。標(biāo)準(zhǔn)溶液中麥角甾醇組分可以有效檢出，且峰型優(yōu)異，理論塔板數(shù)高?？瞻兹軇?duì)麥角甾醇組分的檢測(cè)無干擾影響。通過檢測(cè)食用菌實(shí)際樣品，樣品中其他組分與麥角甾醇實(shí)現(xiàn)基線分離，對(duì)麥角甾醇組分的檢測(cè)無干擾影響。說明Hypersil BDS C18色譜柱的分離效果好，方法專屬性高。

圖1：食用菌實(shí)際樣品色譜圖

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圖2：標(biāo)準(zhǔn)溶液（黑）和空白溶劑（紅）色譜圖

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圖3：色譜峰結(jié)果

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配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，考察線性情況。在濃度1-100μg/mL內(nèi)呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，R2＞0.999，說明此方法線性關(guān)系好。

圖4 標(biāo)準(zhǔn)曲線（點(diǎn)擊查看大圖）

圖5 標(biāo)準(zhǔn)曲線結(jié)果

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為了驗(yàn)證方法的精密度，分別選擇3種干品和3種鮮品食用菌實(shí)際樣本，每種樣本均平行處理并測(cè)定6次。得到的檢測(cè)結(jié)果中每種食用菌樣本均具有良好的精密度結(jié)果，RSD為0.34%~0.99%，說明方法精密度良好。

表1 鮮品樣本精密度

表2 干品樣本精密度

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實(shí)驗(yàn)還利用3種食用菌實(shí)際樣本，分別從低中高3種濃度水平進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，考察方法的準(zhǔn)確度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，3種樣本均具有良好的回收率檢測(cè)結(jié)果，平均回收率為98.2%~99.9%，說明方法的準(zhǔn)確度高。

表3 回收率數(shù)據(jù)

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總結(jié)與展望：

綜上所述，通過賽默飛Vanquish Core液相色譜進(jìn)行檢測(cè)方法驗(yàn)證，取得了理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，方法的專屬性、線性關(guān)系、精密度、準(zhǔn)確度均良好。

賽默飛Vanquish系列液相色譜自問世以來，廣泛服務(wù)于制藥、食品、環(huán)境及化工等不同領(lǐng)域。作為新一代的液相色譜平臺(tái)，其獨(dú)特的模塊化設(shè)計(jì)，多類型泵及進(jìn)樣模塊，靈活的柱溫雙控溫模式，高靈敏的檢測(cè)器，全方位保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠性及準(zhǔn)確性，同時(shí)大大提高了樣品的通量及分析速率，日漸成為綠色環(huán)保、提速增效的代表性實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品，受到了來自各行各業(yè)客戶的一致好評(píng)。

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GH/T 1475-2024標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布實(shí)施填補(bǔ)了我國食用菌功能成分檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)的空白，為食用菌中游離麥角甾醇的檢測(cè)提供了全國統(tǒng)一的、科學(xué)可靠的方法規(guī)范。通過統(tǒng)一檢測(cè)方法，標(biāo)準(zhǔn)有效解決了此前因方法差異導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果不可比問題，顯著提升了檢測(cè)數(shù)據(jù)的可靠性、可比性和權(quán)威性。標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施為食用菌產(chǎn)業(yè)質(zhì)量升級(jí)提供了技術(shù)支撐，對(duì)產(chǎn)業(yè)鏈各環(huán)節(jié)也產(chǎn)生深遠(yuǎn)影響，對(duì)推動(dòng)產(chǎn)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化、優(yōu)質(zhì)化和國際化發(fā)展具有重要意義。

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